Evaluación de primers reportados para detección de KDR en especies de Anopheles colectadas en los departamentos de Caaguazú y Alto Paraná en Paraguay / Evaluation of primers reported for KDR detection in Anopheles species collected in the departments of Caaguazú and Alto Paraná in Paraguay

Las mutaciones KDR en el gen del canal del sodio (VGSC) han sido ya detectadas en al menos 13 especies de mosquitos Anopheles en su mayoría especies de África, pero aún resta por determinar los cebadores específicos para la detección en especies de Latinoamérica. En nuestro país la especie Anopheles darlingi es el vector principal de la malaria, y el A. albitarsis, el vector secundario. Se emplearon muestras de mosquitos Anoheles de las especies A. strodei, A. albitarsis, A. fluminensis, A. evansae, A. nuneztovari, A. nyssorhynchela lutzi y A. oswaldoi capturadas en los departamentos de Caaguazú y Alto Paraná en Paraguay. Para la amplificación y secuenciación se usaron cebadores reportados para el gen VGSC de A. albimanus en Guatemala, que resultaron ser específicos solo para la especie A. strodei. La secuencia revela el codón TTA que codifica para una Leucina como la secuencia TTG, reportada para la versión susceptible en la posición L1014. El fragmento amplificado es de aproximadamente 225 pares de bases. A nuestro entender, esta es la primera caracterización del gen VGSC en mosquitos Anopheles del Paraguay y para la especie A. strodei

KDR mutations in the sodium channel gene (VGSC) have already been detected in at least 13 species of Anopheles mosquitoes, mostly African species, but the molecular techniques for detection in Latin American species have yet to be determined. In our country, Anopheles darlingi species is the main vector of Malaria, and A. albitarsis, the secondary vector. We used samples of Anoheles from the species A. strodei, A. albitarsis, A. fluminensis, A. evansae, A. nuneztovari, A. nyssorhynchela lutzi and A. oswaldoi collected at the departments of Caaguazú and Alto Paraná in Paraguay. For the amplification and sequentiation, primers reported for the VGSC gen of A. strodei in Guatemala were used and were specific only for A. strode in this case. The sequence revealed the TTA codon that codifies for a leucine as the TTG sequence, reported for the susceptible version at position L1014. The amplified fragment is approximately 225 base pairs. To our knowledge, this is the first characterization of the VGSC gene in Anopheles mosquitoes in Paraguay and for the species A. strodei

Vigilancia molecular de la malaria en potenciales reservorios silvestres que viven en una región históricamente endémica de Paraguay / Molecular surveillance of malaria in potential wild reservoirs that live in a historically endemic region of Paraguay

En Paraguay, no se han registrado casos autóctonos de malaria desde el 2011. Se realizó un estudio descriptivo observacional transversal en 6 monos y 23 aves que vivían en una región históricamente endémica de Paraguay para buscar presencia de reservorios silvestres de parásitos plasmodios causantes de la malaria. El ADN se extrajo por el método de Chelex a partir de una gota de sangre en un papel de filtro, y la detección del parásito se realizó mediante la PCR múltiple semianidada. Por este método, no se detectaron parásitos en ninguna de las 29 muestras. Se evaluó el riesgo potencial de circulación selvática de los parásitos que causan la malaria. Teniendo en cuenta la presencia de mosquitos anofelinos vectores en la zona, el hecho de que no se hayan observado casos positivos es un buen indicador teniendo en cuenta que nuestro país fue declarado recientemente como país libre de malaria por la OMS(AU)

In Paraguay, autochthonous cases of malaria have not been recorded since 2011. A cross-sectional observational descriptive study was conducted in 6 monkeys and 23 birds living in a historically endemic region of Paraguay to identify wild reservoirs of plasmodium parasites that cause malaria. DNA was extracted by the Chelex method from a blood drop in a filter paper, and parasite detection was performed by the seminested multiplex PCR. By this method, parasites were not detected in any of the 29 samples. The risk of potential sylvatic circulation of the parasites causing malaria was evaluated. Considering the presence of anopheline mosquitoes in the area, the fact that we did not find any positive cases is a good indicator as our country was recently certified as a malaria-free country by the WHO(AU)

Identificación molecular del sexo en 9 especies de aves del Centro de Investigación en Animales Silvestres de la hidroeléctrica de Itaipu, lado paraguayo / Sex identification by molecular methods in 9 species of birds from the wild animal research center of Itaipu dam on the paraguayan side

La importancia de determinar el sexo en especies monomórficas que viven en cautiverio conlleva a estrategias de apareamiento a fin de poder incentivar la reproducción. Existen métodos no moleculares de reconocimiento pero son factibles en edad adulta y mucho más difícil cuando son polluelos. Mediante la técnica molecular de PCR, se amplificó el gen de la Cromo Helicasa de Unión al ADN empleando los cebadores, 2550F/2718R. Por este método molecular se consiguió determinar el sexo en 19 de 23 especies de las cuales 3 son ejemplares de: Amazona aestiva, 1 de Pipile grayi, 1 de Bubo virginianus, 4 de Ara chloropterus, 6 de Crax fasciolata, 2 de Caracara plancus, 3 de Chauna torquata, 1 de Cariama cristata y 2 de Cairina moschata del Centro de Investigación de Animales Silvestres de ITAIPU binacional, del lado paraguayo. Nuestros resultados sugieren que el par de cebadores 2550F/2718R podría ser de utilidad para determinar el sexo en las especies estudiadas en el país.

In monomorphic species living in captivity, determining the sex is important because it may allow choosing mating strategies to enhance reproduction. Sex can be determined either by non-molecular recognition methods, which are only feasible in adult birds, or by molecular techniques, which may allow sexing monomorphic species at young ages. Thus, in this study, we used molecular techniques such PCR to amplifying the CHD gene by using 2550F/2718R primers. This method allowed us to determine the sex in 19 out of 23 bird specimens from the Centro de Investigación de Animales Silvestres (CIASI) of the ITAIPÚ BINACIONAL at Paraguayan side. The specimens belonged to the following species: Amazona aestiva (3), Pipile grayi (1), Bubo virginianus (1), Ara chloropterus (4), Crax fasciolata (6), Caracara plancus (2), Chauna torquata (3), Cariama cristata (1) and Cairina moschata (2). The 2550F/2718R primers were useful for determine the sex of the studied species.